目的: 探讨巨噬细胞焦亡是否参与支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)的肺病理损伤。方法: 40只足月新生小鼠随机分为空气(room air,RA)组和高氧(hyperoxia,HO)组,每组20只。建立慢性高氧诱导的BPD小鼠模型。HE染色评估小鼠的肺泡化情况;CD31免疫组化检测肺血管发育状况;Masson染色分析肺组织的纤维化程度;qRT-PCR检测肺组织中的炎症因子和趋化因子(Il6、Il1b、Mmp12、Ccl2、Ccl5、Il8)基因表达水平;ELISA检测血清和肺组织匀浆中的IL-1β水平;Western blot检测细胞焦亡通路的关键蛋白NLRP3、Caspase-1 p20、N-消皮素D(gasdermin D,GSDMD)、IL-1β表达;流式分析支气管肺泡灌洗液中巨噬细胞比例;免疫荧光检测F4/80与NLRP3/Caspase-1/IL-1β的共定位;免疫组化分析AQP5的表达水平。结果: 与RA组相比,HO组小鼠的肺泡化阻滞和肺血管生成障碍,肺纤维化显著增加;肺组织中促炎细胞因子的表达显著上调,细胞焦亡相关蛋白表达水平显著增加,血清和肺组织匀浆中IL-1β水平显著升高;支气管肺泡灌洗液中巨噬细胞比例显著升高,肺组织中F4/80与NLRP3、Caspase-1、IL-1β均存在显著的免疫荧光共定位现象,AQP5阳性的肺泡Ⅰ型上皮细胞严重受损。结论: 高氧诱导的BPD小鼠模型中,NLRP3/Caspase-1/GSDMD细胞焦亡通路过度活化,可能导致BPD的肺部病理损伤。
目的: 探究溴结构域蛋白2(bromodomain containing 2,Brd2)对小鼠C2C12成肌细胞分化能力的影响及作用机制。方法: 通过GEO数据库分析Brd2在肌营养不良患者和健康人骨骼肌组织中的表达水平。用含2%马血清的分化培养基体外诱导C2C12成肌细胞分化,利用Western blot检测分化过程中Brd2的表达。利用慢病毒介导的过表达和RNA干扰技术在C2C12成肌细胞中分别过表达和敲低Brd2,诱导后用细胞免疫荧光实验检测肌管形成情况,通过Western blot检测分化标志物蛋白表达水平的变化。通过转录组测序及相关实验探究Brd2在上述过程中发挥调控作用的分子机制。结果: Brd2在肌营养不良患者的骨骼肌中低表达;体外诱导C2C12成肌细胞分化,第2天时Brd2表达升高,第8天时表达降低;敲低Brd2可以抑制成肌细胞的分化,过表达Brd2则可以促进成肌细胞分化;Wnt/β-catenin信号通路的活性受到Brd2的调控。结论: Brd2通过Wnt/β-catenin信号通路调控成肌细胞的分化,初步提示Brd2可能有利于骨骼肌的再生。
目的: 探讨膀胱灌注卡介苗(Bacillus Calmette-Guérin,BCG)对于中高危非肌层浸润性膀胱癌(non-muscle invasive bladder cancer,NMIBC)的疗效,结合术前血液学指标建立疗效预测模型筛选获益人群。方法: 回顾性分析2014年1月至2019年1月收治于复旦大学附属中山医院泌尿外科258例中高危NMIBC患者。所有患者均采用尿道膀胱肿瘤切除术后膀胱灌注卡介苗治疗,记录患者术前血液学指标及临床病理信息。在训练集(n=180)中采用LASSO回归和Cox多因素回归模型筛选预后因子,同时建立疗效预测模型,利用C-index验证模型预测效能,并在验证集(n=78)中进行确认。结果: 258例患者均获得有效随访,中位随访时间为53.0个月(12.0~98.2个月),总体复发率为31.0%(80/258),1年复发率为15.1%(39/258),3年复发率为25.6%(66/258),通过LASSO回归方法筛选出中性粒细胞和C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)作为预后因子,纳入多因素Cox分析,显示灌注前行二次经尿道膀胱肿瘤切除术(P=0.001),高龄(> 70岁)(P=0.008)、CRP(P=0.002)和中性粒细胞(P=0.044)是中高危NMIBC患者行膀胱灌注卡介苗疗效的独立预测因子。疗效预测模型在训练集中的C-index为0.744,在验证集中的C-index为0.847。结论: 膀胱灌注卡介苗治疗对中高危NMIBC安全有效,本研究所建立疗效预测模型(包含中性粒细胞、CRP、高龄和二次经尿道膀胱肿瘤切除术)预测中高危NMIBC患者膀胱灌注卡介苗疗效的准确性较高。
目的: 利用四联抗生素清除肠道内微生物群,探讨肠道共生菌群对不同饮食喂养的ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的影响。方法: 采用ApoE-/-小鼠作为动物模型,分别给予普通饲料和高脂饲料喂养,分为对照组和抗生素组,抗生素组用四联抗生素(万古霉素+甲硝唑+硫酸新霉素+氨苄青霉素)干预14周。用油红O染色评估小鼠主动脉粥样硬化斑块形成的情况,用ELISA测定血清脂代谢指标及IL-1β、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)的水平,用Western blot和免疫组化检测小鼠回肠及结肠上皮细胞中炎症因子及紧密连接蛋白的表达。结果: 普通饲料喂养下,抗生素组小鼠主动脉粥样硬化斑块面积比对照组明显增多(P=0.016),血清IL-1β及TNF-α水平显著升高(P=0.005,P=0.021),小鼠回肠组织炎症因子IL-1β和TNF-α的表达显著升高(P=0.003,P=0.007),肠上皮组织紧密连接蛋白表达明显下降(P < 0.05)。高脂饲料喂养下,抗生素组小鼠主动脉粥样硬化斑块面积较对照组显著减少(P=0.040);血清总胆固醇水平下降(P < 0.001),血清LPS水平降低(P=0.003),小鼠肠道组织的炎症因子TNF-α(回肠:P=0.030,结肠:P=0.029)、IL-6(回肠:P=0.040,结肠:P=0.001)和IL-1β(回肠:P=0.004,结肠:P=0.017)的表达均明显降低,而肠上皮组织紧密连接蛋白表达并没有变化。结论: 清除ApoE-/-小鼠肠道内微生物群可上调系统性炎症水平,并促进动脉粥样硬化斑块形成,由此推测正常的肠道共生菌对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化具有保护作用。
目的: 了解苏州地区儿童侵袭性肺炎链球菌的血清型和耐药特征。方法: 系统收集2010—2020年间苏州大学附属儿童医院分离的侵袭性肺炎链球菌菌株,采用Kirby-Bauer纸片扩散法或E-test法检测抗菌药物的敏感性,通过荚膜肿胀试验进行血清分型。结果: 研究期间共分离到215株侵袭性肺炎链球菌,28.4%的菌株来自脑膜炎患儿。菌株对青霉素G的不敏感率为35.9%,13价肺炎球菌结合疫苗(13-valent pneumococcal conjugate vaccine,PCV13)的血清型覆盖率为93.2%,其中最常见的血清型为6B、14、19F、19A和23F。近年来,头孢噻肟和复方新诺明的不敏感率有所下降,血清型6B、14的占比显著下降、而血清型19F、23F的占比则有所上升。结论: 苏州地区儿童侵袭性肺炎链球菌菌株PCV13疫苗血清型覆盖率高,菌株对青霉素中度敏感,不同时间和不同疾病来源分离株的血清型和耐药性存在差异。
目的: 检测兔膀胱出口部分梗阻(partial bladder outlet obstruction,pBOO)及解除后膀胱功能和细胞超微结构的改变。方法: 将24只雄性新西兰白兔分为梗阻组、梗阻解除组和对照组,每组8只。梗阻组动物行手术部分结扎膀胱颈部,建立pBOO动物模型。随后进行膀胱容量、膀胱重量测试,并提取兔逼尿肌组织,于透射电镜下对细胞内线粒体、内质网等超微结构进行观测,并于多种缓冲液中对逼尿肌束进行肌肉收缩力检测。结果: 对照组膀胱重量明显低于其他两组,在除无Ca2+液以外溶液中对照组单位重量逼尿肌最大收缩速度及最大张力都明显大于梗阻解除组,而梗阻组与梗阻解除组之间无明显差异。梗阻组较对照组内质网明显扩张,线粒体水肿明显,且相对密度下降。讨论: 梗阻2周后兔逼尿肌内质网与线粒体均发生形态学改变且未能恢复正常,此变化可能同逼尿肌膀胱功能下降相关。
目的: 比较4种不同血栓风险评分模型对产褥期静脉血栓栓塞症(venous thromboembolism,VTE)的预测价值。方法: 通过医院电子病史系统检索2017年8月至2022年12月在同济大学附属上海市第一妇婴保健院分娩后发生VTE的产妇并进行回顾研究,纳入255例VTE产妇(病例组),并按照1∶3的比例随机选取765例同期分娩但未发生VTE的产妇(对照组)。分别采用Caprini评分、RCOG指南、昆士兰指南和上海市专家共识等4种VTE风险评分模型对2组患者进行评分及风险分类,绘制ROC曲线以评估不同模型对产褥期VTE的预测价值。分析VTE产妇在4种评分模型中的风险等级和累计风险评分的分布情况。结果: 2组产妇比较显示,病例组的年龄、体重指数以及双胎妊娠、剖宫产、早产和子痫前期的发生比例均显著高于对照组(P<0.001)。4种评分模型Caprini评分、RCOG指南、昆士兰指南和上海市专家共识的AUC分别为0.676、0.763、0.782和0.767,差异有统计学意义(P<0.05)。按照风险分级进行比较,昆士兰指南可以将更多的VTE产妇筛选至高风险组。结论: RCOG指南、昆士兰指南和上海市专家共识等3种VTE风险评分模型的预测价值均高于Caprini评分,适用于产褥期VTE的预测评估,其中以昆士兰指南的准确度最高。
目的: 探讨心脏外科术后新发脑卒中患者院内死亡的风险因素并总结护理对策。方法: 回顾性分析2020年6月1日至2022年8月31日在复旦大学附属中山医院行心脏外科手术且术后发生脑卒中患者的资料,通过Logistic回归分析影响患者院内死亡的风险因素。结果: 共纳入170例心脏外科术后发生脑卒中的患者,卒中的类型以单纯的缺血性脑卒中(153例,90%)为主。32例患者在住院期间死亡,死亡率为18.82%。Logistic回归分析结果显示,术后左室射血分数(left ventricular ejection fractions,LVEF)(OR=0.944,95%CI:0.913~0.976)、术后昏迷(OR=2.709,95%CI:1.027~7.146),术后肾脏替代治疗(OR=7.298,95%CI:2.719~19.593),术前氨基末端脑利钠肽前体(N-terminal fragment brain natriuretic peptides,NT-pro BNP)(OR=1.094,95%CI:1.010~1.184)是心脏外科术后脑卒中患者院内死亡的独立风险因素。结论: 心脏外科术后新发脑卒中患者死亡风险高,与围术期心脏功能不全、术后肾功能损伤以及术后发生昏迷有关。
目的: 探讨淋巴结内痣(nodal nevi,NN)的临床病理学特征及鉴别诊断要点。方法: 收集上海市静安区中心医院2018年至2019年诊断的2例NN患者,回顾性分析其临床病理学特征,行HE染色及免疫组化染色进行观察分析,并复习相关文献。结果: 患者均为女性,年龄分别为48岁和50岁,均无恶性黑色素瘤病史,因乳腺癌行改良根治术后于腋窝淋巴结内发现NN。术后随访44~49个月,2例患者均未见复发及转移。镜下2例NN的痣细胞呈巢团状聚集,分别位于淋巴结被膜处及边缘窦内,病灶最大径分别为2 mm和2.5 mm,痣细胞形态温和,类似于皮肤的良性色素痣细胞,缺乏明显的异型性及核分裂象。免疫组化检测结果示S100均呈强阳性表达,SOX10、P16均呈阳性,Ki67阳性计数均<1%;HMB45、KP-1、CKpan均呈阴性。结论: NN是一种少见的良性淋巴结内黑色素细胞增生性病变,结合临床病史、组织病理学特征、免疫组化及分子检测结果有助于与淋巴结转移性癌及转移性恶性黑色素瘤相鉴别。
目的: 总结幕下开颅肿瘤手术并发的远隔部位血肿病例,探讨早期识别方法和防治策略。方法: 回顾性分析复旦大学附属华山医院神经外科颅底亚专科组自2019年12月至2021年11月收治的幕下开颅肿瘤手术患者的临床资料,总结远隔部位血肿发生部位、血肿类型,分析产生原因,探讨术中术后如何早期识别及防治策略。结果: 490例幕下开颅肿瘤手术患者中,出现远隔部位血肿18例(3.67%),其中幕上硬膜下血肿9例,枕部硬膜外血肿3例,幕上硬膜下血肿合并纵裂血肿2例,脑室内血肿2例,纵裂血肿1例,颞叶脑内血肿合并蛛网膜下腔出血1例。2例患者术中准确识别,终止手术,术中CT复查明确出血类型后手术治疗;16例在术后早期识别,CT复查明确出血类型,1例采取手术治疗,15例采取保守治疗。所有18例病例术后随访2~21个月,无死亡病例。结论: 幕下开颅肿瘤手术并发远隔部位血肿是一种少见且严重威胁手术安全的并发症,多表现为幕上硬膜下血肿、硬膜外血肿、脑室内血肿及脑内血肿等,可合并蛛网膜下腔出血;围手术期积极预防、早期准确识别和及时有效的处理能显著改善患者的预后。
目的: 开发一种无创条件下于外周神经系统表达腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)以特异性操纵神经节神经元的方法。方法: 出生0天的小鼠腹腔注射10 μL AAV2/9-EGFP,病毒滴度为(2~5)×1012 vg/mL,待小鼠长至2月龄时灌注取各组织、器官切片,免疫荧光染色,观察增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)的亮度及范围,判断病毒感染情况。结果: 69.11%±1.42%的背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)神经元,7.08%±1.16%的三叉神经节(trigeminal ganglion,TG)神经元,32.46%±1.81%的迷走神经节(nodose ganglion,NG)神经元和4.76%±0.29%的交感神经节(sympathetic ganglion,SG)神经元被感染。脑、脊髓、内脏器官中的神经元被感染效率极低。结论: 本方法可特异性感染神经节神经元,但对神经胶质细胞、中枢神经系统神经元或外周器官感染效率极低,可用于特异性操纵神经节神经元。
目的: 构建基于真实临床情景下的提升上海市儿科医护人员急诊急救能力的培训方案。方法: 在复旦大学附属儿科医院门急诊电子病例系统中获取2019年1月—2021年12月进入急诊抢救室的病历,提取急诊诊疗活动名称及具体内容,结合专家访谈及德尔菲法形成儿科急诊急救可信赖专业活动(entrustable professional activities,EPAs)清单;由急诊专业领域权威专家对儿科急诊急救可信赖专业活动及内容就相关性及重要性进行评分;在前述工作的基础上,形成《儿科医护人员急诊急救能力提升培训方案》,邀请急诊医疗、护理、管理及教学相关专业专家进行两轮函询并进行专家论证。结果: 《儿科医护人员急诊急救能力提升培训方案》包括理论和技能两大核心板块,并根据课程内容设置不同培训方式。经专家论证该方案契合临床真实情境,具有较强的科学性和实用性。结论: 《儿科医护人员急诊急救能力提升培训方案》成功构建,可为临床实施有针对的培训继而提升儿科急诊医务人员的急救能力提供参考。
肝癌是全球癌症死亡的第四大原因。80%~90%的肝癌是从肝炎、肝纤维化和肝硬化中发展而来。本综述着眼于肝纤维化对免疫微环境的影响,探讨肝纤维化成分(肝星状细胞、肌成纤维细胞、癌相关成纤维细胞、细胞外基质化学和物理因素)通过相关途径影响固有免疫和适应性免疫反应,进而形成免疫抑制性微环境,促进肝癌发生发展。
糖尿病是临床上常见的慢性多系统性疾病。长期的高糖刺激会损伤机体的血管系统,导致糖尿病肾病、糖尿病视网膜病变和糖尿病周围神经病变等微血管并发症,严重影响患者的生活质量和预期寿命。在糖尿病微血管病变中,细胞间的级联信号传递系统起到关键作用。外泌体(exosome)是直径介于40~160 nm,由多种细胞释放到细胞外的纳米级微小囊泡,可携带核酸、蛋白质、脂质等多种生物活性分子完成细胞间的信息传递。微小核糖核酸(microRNA,miRNA)是一类长度约为22个核苷酸的非编码RNA,可被囊泡包裹在外泌体中构成外泌体miRNAs,进而调控受体细胞的表型和功能变化。多项研究表明外泌体miRNAs是糖尿病微血管病变发生发展的关键调节因子,有望成为糖尿病微血管并发症的诊断标志物和治疗靶标。本文综述近年来国内外有关外泌体miRNAs在糖尿病微血管并发症的研究,期望为外泌体miRNAs在糖尿病微血管并发症的研究提供新思路。
猴痘是一种由猴痘病毒引起的人兽共患病,其作为一种自限性疾病,以往缺乏特异性药物。自2022年5月以来,在全球不同区域内人类猴痘病例明显增加。已有国家将针对天花的抗病毒药物(如替考韦马、布林西多福韦、西多福韦等)和痘苗免疫球蛋白作为猴痘特异性治疗药物,主要用于重症和高危人群。虽然天花疫苗接种可能对猴痘病毒具有保护作用,并可能改善临床症状,然而是否需要接种疫苗,需要根据易感者或者暴露者个体的免疫状态、被感染的风险、可能发生感染的严重程度以及是否可以获取抗病毒药物来综合决定。目前不同国家可获取的天花疫苗共有3种:JYNNEOSTM、ACAM2000®和安万特巴斯德天花疫苗,其中前两种目前被推荐用于猴痘的预防接种。疫苗接种策略包括暴露前接种、暴露后预防和密切接触者的环形疫苗接种。本文就猴痘的背景知识、流行病学、预防治疗等方面进行综述,以期能为猴痘的防治和应急管理工作提供帮助。
经皮脊柱内窥镜下腰椎间盘切除术(percutaneous endoscopic lumbar discectomy,PELD)通常指经皮脊柱内窥镜下经椎间孔椎间盘切除术(percutaneous endoscopic transforaminal discectomy,PETD)和经皮脊柱内窥镜下经椎板间椎间盘切除术(percutaneous endoscopic interlaminar discectomy,PEID)。与常规开放椎间盘切除术相比,PELD术式治疗腰椎间盘突出症(lumbar disc herniation,LDH)具有恢复快、住院时间短、手术效果满意等优点,对正常生理组织结构和脊柱稳定性影响小,逐渐成为临床主流术式。随着社会人口结构老龄化,LDH呈现发病率增高的趋势,并严重影响了患者的生存质量,造成了一定的社会负担。本文旨在通过介绍PELD技术,进一步对PELD治疗复杂移位型LDH展开综述。
瘙痒是一种可引起抓挠行为的不愉快的躯体感觉。许多皮肤疾病及一些系统性疾病等都存在慢性瘙痒的症状,顽固而剧烈的瘙痒严重影响患者的身心健康和生活质量。稳定可靠且能模拟临床的动物模型是瘙痒机制研究和治疗靶点筛选的基础。近年来,学界探索建立了多种瘙痒动物模型,并在此基础上探讨瘙痒机制。本文总结了慢性瘙痒的小鼠模型制作和行为学评价方法,为今后开展瘙痒研究提供参考。
基础/静息能量代谢率的测量在2型糖尿病患者的饮食、运动管理中起着重要的作用。关于2型糖尿病患者的能量代谢率的研究有很多,但结果不一致,通过对这些研究的总结分析,本文综述了2型糖尿病患者中能量代谢率的变化趋势,并分别在器官组织水平和细胞水平总结了影响能量代谢率变化的主要因素,以期对糖尿病的管理和治疗有所帮助。
垂体促甲状腺细胞腺瘤是一类临床罕见的垂体腺瘤。本文报道1例以甲状腺毒性周期性麻痹(thyrotoxic periodic paralysis,TPP)为首发临床表现的患者,检查发现低钾血症,合并甲状腺激素明显升高伴促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone,TSH)水平未被抑制,MRI提示垂体腺瘤,诊断为垂体促甲状腺细胞腺瘤。使用生长抑素类似物奥曲肽,术前准备后进行神经内镜下手术治疗,术后患者甲状腺功能恢复正常水平,垂体MRI未见肿瘤残留和复发。