目的 研究前期筛选到的精子功能调节候选化合物色瑞替尼的体外精子制动作用和机制。方法 计算机辅助精液分析(computer assistant sperm analysis, CASA)系统测定色瑞替尼对人和小鼠高活力精子20 s内的制动效果;低渗膨胀(hypo-osmotic swelling, HOS)实验、SYBR-14/PI染色探究精子质膜的完整性;用电镜观察色瑞替尼处理后精子质膜的变化;用色瑞替尼处理VK2/E6E7、End1/E6E7、Ect1/E6E7细胞,CCK-8及荧光染色法检测细胞活性。结果 色瑞替尼对于(5～10)×106/mL人精子的20 s瞬间杀精最小有效浓度(minimal effective concentration, MEC)为(74.87±31.46)μmol/L,而相同条件下测到的杀精药物壬苯醇醚(nonoxynol-9, N-9)的MEC为(219.75±20.89) μmol/L。CASA系统分析表明,色瑞替尼对精子的制动作用有时间-浓度依赖关系。HOS实验及SYBR-14/PI染色法验证色瑞替尼对精子质膜有一定的损伤,并可致精子死亡。电镜显示色瑞替尼处理后的精子质膜破裂,头尾分离较多。色瑞替尼对上皮细胞有一定损伤。结论 色瑞替尼对精子有快速的制动作用,具有潜在的避孕药效。
目的 探讨急性冠脉综合征(acute coronary syndrome, ACS)早期单核细胞亚群及其趋化因子即单核细胞趋化蛋白-1 (monocyte chemoattractant protein, MCP-1)和不规则趋化因子(fractalkine, FKN)的表达特点,并分析其相关性。方法 选取我院2016年9月至12月以胸痛症状入院拟行冠脉造影术(coronary angiography, CAG)的患者。手术当天术前抽取静脉血,采用流式细胞术检测外周血单核细胞(monocyte, Mon) 3个亚型的含量及其比例,依据分化抗原-14 (cluster differentiation-14, CD-14)和CD16表达分为3个亚型即CD14+CD16-Mon (Mon1)、CD14+CD16+Mon (Mon2)和CD14-CD16+Mon (Mon3);手术当天术前及术后一天抽取静脉血,ELISA检测Mon1的趋化因子MCP-1和Mon3的趋化因子FKN水平,比较不同组MCP-1-Mon1和FKN-Mon3水平变化,并分析其相关性。结果共入选70例患者,结合其临床症状、心肌标志物、心电图、CAG检查结果进行诊断分组:急性心肌梗死(acute myocardium infarction, AMI)组患者30例、不稳定性心绞痛(unstable angina pectoris, UAP)组患者25例、CAG完全正常者(对照组) 15例。流式细胞术结果显示AMI组Mon1所占比例高于UAP组和正常对照组(P<0.05),Mon3在各组间尚无差异。AMI组患者外周血Mon3/Mon1比值低于对照组(P<0.05)。AMI组和UAP组患者FKN、MCP-1和红细胞分布宽度均高于对照组,并且FKN和Mon3具有强相关性(P<0.05;R=0.650 2)。结论 单核细胞亚群(Mon1和Mon3)在ACS早期水平增高,并伴有其负责招募的趋化因子(MCP-1和FKN)增加,且FKN和Mon3具有强相关性,提示MCP-1Mon1和FKN-Mon3两条通路可能参与患者ACS早期病理生理过程。
目的 探讨中国冠心病患者CYP2C19基因多态性影响氯吡格雷疗效的分子机制。方法 入组208例接受冠状动脉介入治疗(percutaneous coronary intervention, PCI)的稳定型冠心病(stable coronary artery disease, SCAD)患者,采用PCR产物直接测序的方法对所有纳入对象进行CYP2C19基因多态性分析,血栓弹力图检测300 mg氯吡格雷负荷量24 h后的血小板聚集率,流式细胞仪检测P2Y12受体下游信号分子血管扩张刺激磷蛋白血小板反应性指数(vasodilator-stimulated phosphorylation-platelet reactivity index, VASP-PRI)和Akt磷酸化(P-Akt)水平。结果 208例患者中85例(40.9%)的基因型为CYP2C19*1/*1 (非携带者),无等位基因缺失(loss-of-function, LOF),93例(44.7%)为CYP2C19*1/*2或CYP2C19*1/*3(1个LOF),30例(14.4%)为CYP2C19*2/*2或CYP2C19*2/*3 (2个LOF)。氯吡格雷治疗后的血小板聚集率及VASP-PRI随着携带LOF数目的增加而增加,而P-Akt只在2个LOF的情况下才会明显增加。VASP-PRI与氯吡格雷治疗后血小板聚集率有相关性(r=0.672,P<0.001),但是与P-Akt不相关。结论 携带2个CYP2C19 LOF的SCAD患者经氯吡格雷治疗后血小板聚集率更高,并与活性更高的G蛋白偶联受体P2Y12信号通路相关。
目的 探讨甲状腺良性大结节射频消融(radiofrequency ablation, RFA)和微波消融(microwave ablation, MWA)治疗的近期安全性和有效性。方法 选取2016年6月至2017年2月我院采用超声引导下RFA (13例)和MWA (21例)治疗甲状腺良性大结节的患者,随访观察比较两种消融术后甲状腺功能、血清抗体指标变化、并发症和甲状腺结节缩小率(volume reduction rate, VRR)。结果 所有患者治疗前后血清游离三碘甲腺原氨酸(free triiodothyronine, fT3)、游离甲状腺素(free thyroxine, fT4)、促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone, TSH)、抗甲状腺球蛋白抗体(anti-thyroglobulin antibodies, TG-Ab)及抗甲状腺过氧化物酶抗体 (thyroid peroxidase antibodies, TPO-Ab)差异均无统计学意义(P＞0.05)。MWA组1例患者术后出现轻度声音嘶哑,RFA组1例出现术中出血10 mL,余患者均未发生颈部瘢痕、术后感染、皮肤灼伤及气管食管损伤等并发症。消融后1天超声造影显示结节均无血供,呈低弱回声;消融后1个月RFA组和MWA组VRR分别为23.8%和22.6%,两者治疗效果差异无统计学意义(P=0.127)。结论 RFA和MWA治疗甲状腺良性大结节安全有效且并发症少,两者近期治疗效果无显著差异。
目的 研究核仁素核酸适配体(AS1411)介导信号转导与转录激活因子3 (signal transduction and activator of transcription 3, STAT3)反义寡核苷酸(antisense oligonucleotide, ASO)靶向抗肿瘤的作用。方法 以RNA为耦联分子,连接靶向分子AS1411和效应分子ASO。以RNA Structure软件对预合成的不同RNA碱基耦联构建的嵌合体分子二级结构进行预测分析。以琼脂糖凝胶电泳检测嵌合体分子在血清及细胞裂解液中的稳定性。通过流式细胞术和荧光共聚焦实验检测AS1411介导STAT3 ASO进入肿瘤细胞的情况。通过CCK-8试剂盒检测STAT3 ASO对肿瘤细胞生长的抑制情况。通过RT-PCR和Western blot分析ASO对肿瘤生长相关基因表达的影响。结果 AS1411可介导STAT3 ASO高效进入肿瘤细胞,抑制C-myc、Cyclin D1、Bcl-xl和PD-L1基因的转录和翻译,并能抑制Du145细胞的生长。结论 AS1411可介导STAT3 ASO靶向进入肿瘤细胞,从而发挥抗肿瘤的作用。
目的 了解上海市艾滋病病毒(human immunodeficiency virus, HIV)阳性的男性同性性行为人群(men who have sex with men, MSM)抑郁症状发生情况及其影响因素。方法 采用横断面研究设计,于2014年11月至2015年11月期间对招募到的HIV阳性的MSM进行问卷调查,抑郁症状评估运用12个条目的流调中心抑郁量表(Center for Epidemiologic Studies Depression Scale, CES-D),得分≥9分则认为有抑郁症状。结果 共调查505名HIV阳性的MSM,中位年龄30岁,21～44岁年龄段为主(77.2%),非本市户籍占64.6%,73.1%未婚,大学及以上学历占62.1%。235人有抑郁症状,检出率为46.5%。多因素Logistic回归分析结果显示:非本市户籍较本市户籍人群(OR=1.66,95% CI:1.01~2.49)、过去一年性伴数>1个较性伴数≤1个的调查对象(OR=2.21,95% CI:1.43~3.41)更易出现抑郁症状;而高中或中专学历较初中及以下学历人群(OR=0.39,95% CI:0.21~0.74)、曾和主要性伴发生过不使用安全套性行为较没有主要性伴(OR=0.38,95% CI:0.17~0.85)的调查对象抑郁的风险降低。结论 HIV阳性的MSM人群抑郁症状检出率高,户籍、学历、是否曾和主要男性伴侣发生过性行为以及过去一年男性性伴数与抑郁的发生有关联,提示需进一步探讨针对该人群的心理干预措施。
