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2012年, 第39卷, 第05期 刊出日期:2012-09-20
  

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    专家论坛
  • 蒋新国
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    血脑屏障上存在诸多受体和转运体,如转铁蛋白受体、低密度脂蛋白受体和己糖转运体等。采用其相应的配体或抗体修饰可构建脑靶向递药系统,有望提高脑组织的药物浓度,增强对脑部疾病的治疗效果,降低毒性作用及不良反应。此外,利用正负电荷的吸附介导和鼻腔给药也可能增加药物的脑内递送。
  • 论著
  • 张巨波;郭坤;朱小东;孔令群;柴宗涛;王文权;陆录;孙惠川△
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    目的 探讨肝癌以及癌旁肝组织中缺氧诱导因子2α(HIF-2α)预测原发性肝癌切除术后复发和预后的价值。方法 从1999年至2006年我所968例原发性肝癌患者中随机选取105例制成组织芯片,随访至2010年3月。采用免疫组织化学方法染色并半定量分析肝癌以及相应的癌旁组织中HIF-2α的表达,分析HIF-2α高低组主要临床相关资料的差异,并评价其与患者复发、预后的相关性。结果 肝癌中HIF2α表达高低和预后无显著相关性。肝癌癌旁肝组织中HIF-2α阴性患者57例,1,3,5年生存率(92.7%,74.5%,58.6%)、无瘤生存率(80.1%,58.6%,44.6%)和早期复发(19例)显著好于癌旁HIF2α阳性患者(46例)的总体生存率(75.4%,50.3%,41.0%)、无瘤生存率(55.1%,35.3%,22.9%)和早期复发(25例)。两组患者的临床病理特征的差异无统计学意义。多因素结果提示癌旁HIF2α高表达为术后总体生存和无瘤生存的独立预后因素。结论 HIF-2α可有效预测原发性肝癌切除术后患者的复发和预后。
  • 岳文杰;刘懿△;徐薇;董乐;罗晓婷;蒋蔚茹;孙旭;钟良;刘杰
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    目的 探讨溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)患者肠黏膜中的细胞因子IL2、IL4、IL17和IL10的表达特点,并分析其与疾病活动度的关系。方法 收集UC患者36例,采用Sutherland疾病活动指数评估UC的炎症活动度。行结肠镜检查时对UC患者的病灶部位及病灶周围正常肠黏膜组织进行活检,以半定量PCR法检测肠黏膜组织中的细胞因子IL2、IL4、IL17和IL10的表达水平。从中选取10例以免疫组化法检测肠黏膜组织中上述各细胞因子的表达,同时检测该10例UC患者外周血的血沉(erythrocyte sedimentation rate,ESR)及C反应蛋白(creactive protein,CRP)值。结果 IL2在UC患者肠黏膜病灶部位中的表达水平明显高于周围正常黏膜。在UC患者不同活动度组间,IL2的蛋白表达水平无显著差异,但轻度组的IL2mRNA表达水平高于中、重度组。IL4在病灶部位中的表达水平明显高于正常黏膜,其中重度UC患者中的IL4表达水平明显高于轻、中度UC患者。IL17 在病灶部位中的表达水平高于正常黏膜,其中重度UC患者中的IL17表达水平明显高于轻、中度UC患者。IL10在病灶部位中的蛋白及mRNA表达水平均高于正常黏膜,但前者差异无统计学意义,其中轻度UC患者中的IL10表达水平明显高于中、重度UC患者。UC患者肠黏膜中上述细胞因子的表达水平与ESR、CRP值均无明显相关性。结论 IL2、IL4、IL17及IL10通过发挥不同的促炎或抑炎作用可能参与介导了UC发病,其mRNA表达水平与UC的炎症活动程度存在一定相关性,其中IL4、IL17及IL10的蛋白表达水平亦与UC的炎症活动程度存在一定相关性,可用来评估UC的炎症程度。
  • 朱奕奕;冯玮;赵琦;徐飚△
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    目的 应用自回归求和移动平均(autoregressive integrated moving average,ARIMA)乘积季节模型分析季节性时间序列,建立上海市病毒性甲型肝炎发病率的预测模型。方法 利用上海市1990年至2011年甲肝按月发病数的历史疫情数据,采用非条件最小二乘法估计模型参数,模型阶数确定后,建立甲肝按月发病数ARIMA乘积季节预测模型。结果 非季节和季节移动平均的参数分别是0.6341和0.9999,季节自回归的参数是0.4059,t检验的P值均<0.0001,方差估计值是0.1593,AIC=282.1478,SBC=292.7242,对建立的模型进行残差的白噪声检验,χ2检验统计量的P值均>0.05,据此建立ARIMA(0,1,1)(1,1,1)12NOINT乘积季节模型,模型表达式(1-0.405 9B12) (1-B) (1-B12)Yt=(1-0.634 1B) (1-0.999 9B12)εt,并开展上海市甲肝发病数的预测。结论 ARIMA(0,1,1)(1,1,1)12NOINT乘积季节模型可用于预测上海市病毒性甲型肝炎发病的季节模型。
  • 郝亚平;马晓静;周密;高美芳陆志刚;杭靖宇;包玉倩△;贾伟平
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    目的 探讨血清游离脂肪酸水平与冠状动脉病变的关系。方法 选择169例(男性105例,女性64例)接受冠脉造影检查的心内科住院患者,年龄38~86岁,应用冠脉狭窄指数(coronary stenosis index,CSI)评价冠状动脉病变的严重程度。结果 (1) 169例研究对象中,115例(男性80例)经冠脉造影证实为冠心病(coronary artery disease,CAD)。男、女性的空腹及餐后2 h游离脂肪酸的差异无统计学意义(P>0.05)。(2) 与非CAD患者(nonCAD)相比,CAD组空腹游离脂肪酸及CSI评分明显升高(P<0.05),而HDLc水平降低(P<0.05)。(3) 单支病变组及多支病变组空腹游离脂肪酸水平均高于无病变组(P<0.05),但餐后2 h游离脂肪酸水平无明显差异(P>0.05)。(4) Logistic回归分析显示,校正其他传统因素后,空腹游离脂肪酸是CAD的独立影响因素。结论 血清空腹游离脂肪酸水平与冠状动脉病变相关。
  • 王来栓;汪吉梅;张金萍;吴冰冰;张蓉;曹云△
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    目的 探讨以小胶质细胞(microglia,MG)为中心Toll样受体4 (toll like receptor4,TLR4) 介导的T细胞获得性免疫炎症损伤机制在早产儿脑白质损伤中的作用。方法 分别分离纯化C3H/HeJ(tlr4基因缺失)小鼠和C57B/L (野生型) 小鼠脾脏CD4+T细胞和大脑MG细胞并制作交互共培养模型。各组分别加以细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)为刺激因素,流式细胞术和细胞化学染色观察MG变化,检测CD4+ T细胞增殖变化和ELISA方法检测其分泌功能;通过上调(LPS刺激)或下调TLR4(tlr4基因缺失)表达对MG活化和共同免疫刺激因子MCH Ⅱ的影响及对CD4+T细胞增殖分化及Th1/Th2极化方向的影响,阐明TLR4在T细胞获得性免疫中的关键作用。结果 显微镜下观察,LPS刺激后tlr4基因缺失小鼠MG细胞胞体较小,突起细长,仍处于静息状态;相反,野生型组LPS刺激后出现较明显的细胞体积变大、胞体变大显圆满,突起增加呈分支状。LPS活化的MG其TLR4和MCH Ⅱ蛋白表达显著上调与tlr4基因缺失小鼠比较有显著性差异(P<0.01)。此外,LPS刺激活化的CD4+ T淋巴细胞增殖明显,且伴有Th1型细胞因子显著升高和Th2型细胞因子的显著下降,与tlr4基因缺失小鼠比较均有显著性差异(P< 0.01)。TLR-4表达与CD4+T细胞Th1细胞因子浓度间具有显著相关性(P<0.01)。结论 TLR-4介导MG活化在固有免疫和获得性免疫中发挥桥梁作用,并由此提出由Th1/Th2偏移向TLR4、Th1偏移的新的早产儿脑白质损伤模式。
  • 赵亚蕊;▲;李宗伟▲;赵邑;赵超;付荣;李汉卿;王兴华;李卓玉△
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    目的 本研究旨在探讨Wnt/βcatenin信号通路和葡萄糖调节蛋白78(glucoseregulated protein 78,GRP78)两者在肠癌细胞中的调控关系。方法 本研究采用氯化锂(LiCl)处理肠癌HT29和DLD1细胞,激活其Wnt/βcatenin信号通路。通过Western blot和荧光定量PCR,检测Wnt信号活化对GRP78表达的影响;通过对细胞组分的分离和免疫荧光染色技术分析Wnt信号活化对GRP78细胞膜转运的影响。结果 LiCl处理能够显著激活HT29和DLD1细胞中的Wnt/βcatenin信号通路,GRP78蛋白在HT29细胞膜表面呈独特的“簇状”分布,LiCl处理明显提高了细胞中GRP78的转录和翻译水平,且GRP78在细胞表面的分布水平也有明显增加。结论 肠癌细胞中GRP78的表达和细胞膜转位受Wnt/βcatenin信号通路活性的调控。
  • 贺轶锋;周俭;黄晓武;黄成;樊嘉;△
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    目的 在肝肿瘤细胞中筛选与肝癌肝移植术后复发相关的差异蛋白,为预测患者预后寻找更灵敏、特异的生物标记物。方法 19例符合“上海标准”的肝癌肝移植患者纳入本项研究,6例术后出现肿瘤复发和转移(复发组),其余13例患者均无瘤存活(无瘤生存组)。利用表面加强激光解吸电离飞行时间质谱技术(surface enhanced laser desorption/ionizationtime of flightmass spectroscopy,SELDITOFMS)建立肝肿瘤细胞蛋白质指纹图谱,生物信息软件(Biomarker Wizard)比较两组之间的蛋白质差异。结果 利用弱阳离子交换(weak cation exchange,WCX2)蛋白质芯片在质核比(m/z)2 000~30 000范围内共检测出163个蛋白峰。在建立的蛋白指纹图谱中,复发和无瘤生存组相比较,6个蛋白差异有统计学意义 (P<0.05)。复发组中上调蛋白4个,m/z分别为212 9、220 3、295 0和306 2;下调2个,m/z分别为370 8和118 56。 结论 由SELDI-TOF筛选出的肿瘤细胞差异蛋白对判断肝癌肝移植患者预后可能有重要意义,差异蛋白可能与微血管癌栓形成有关。
  • 聂玉艳;黄绍强△;罗青妍;李宁
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    目的 通过比较脊麻剖宫产手术蛛网膜下腔不同注药速度的布比卡因半数有效剂量(median effective dose,ED50)探讨注药速度对脊麻感觉阻滞平面的影响。方法 选择ASAⅠ~Ⅱ级拟在腰硬联合麻醉下行择期剖宫产的足月单胎妊娠产妇70例,电脑随机数字法分为快速注药组(F组,n=35)和慢速注药组(S组,n=35),F组与S组蛛网膜下腔分别以0.25和0.025 mL/s的速度注射0.5%等比重布比卡因。采用序贯法进行试验,每组第一例产妇的布比卡因剂量均为6.5 mg,剂量变化梯度为0.5 mg,感觉阻滞有效定义为局麻药注射完毕后15 min双侧无痛的阻滞平面达T6或以上。若上一例产妇有效,则下一例布比卡因的剂量降低0.5 mg,若上一例产妇无效,则下一例产妇布比卡因的剂量增加0.5 mg,采用DixonMood法计算两种注药速度时布比卡因ED50及其95%的可信区间(95%CI)。结果 F组布比卡因的ED50及其95%CI为6.17(6.03~6.32)mg,S组布比卡因的ED50及其95%CI为7.23(7.00~7.46)mg,F组布比卡因的ED50低于S组(P<0.001)。结论 局麻药的推注速度是影响脊麻感觉阻滞平面的因素之一,在一定范围内,注药速度越快,剖宫产手术脊麻时达到相同阻滞平面所需的药物剂量越小。
  • 方主亭;颜志平;罗剑钧;张雯;吴林霖;刘清欣;瞿旭东;王建华;王小林;刘凌晓△
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    目的 总结良性病变所致门静脉海绵样变(cavernous transformation of portal vein,CTPV)介入治疗的经验及临床疗效。方法 回顾性分析2000年至2012年24例在我科行介入治疗的CTPV患者的临床资料。所有患者发病时均有不同程度的呕血、黑便或腹痛等临床症状。经颈内静脉肝内门腔分流术(transjugular intrahepatic portosystemic shunt,TIPSS)联合置管局部溶栓14例,单纯TIPSS治疗或联合冠状静脉栓塞术2例,经皮穿刺脾静脉途径门静球主干囊扩张联合TIPSS治疗1例,经皮肝穿门静脉球囊扩张2例,经皮肝穿门静脉支架植入或联合胃冠状静脉栓塞术2例,脾动脉部分栓塞术(partial splenic embolization,PSE)2例。介入手术中途停止治疗1例。随访2个月~6年,观察门静脉及分流道通畅情况并随访上消化道出血及腹痛情况。结果 随访时间内2例患者分别于术后2年及3年因TIPSS分流道狭窄或闭塞发生再次上消化道出血,行分流道修正术。1例行PSE于术后2年因上消化道出血转外科行脾切除加门奇静脉断流术;1例因无法开通闭塞的门静脉转外科行门奇静脉断流术联合分流;余所有患者未再出血或腹痛发生,门静脉或分流道通畅。结论 介入手术是一种对CTPV安全、有效、微创的治疗方法,选择合适的介入手术方法是治疗成功的关键。
  • 实验研究报道
  • 郭满▲;林晶▲;陈进宏△;蔡端
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    目的 构建骨桥蛋白(osteopontin,OPN)基因RNA干扰慢病毒载体并在小鼠体内鉴定其抑制效果。方法 参照OPN GenBank上的序列,对OPN基因沉默位点进行分析,设计针对OPN信使RNA的小发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)OPNshRNA及阴性对照(negative controlshRNA,NCshRNA)序列,合成pSicoRGFPshRNA重组体。经鉴定序列无误后,与pCMVVSVG 和pCMVdR8.91辅助质粒包装并转染293FT细胞,得到有效滴度为5×109 TU/mL的病毒原液。经尾静脉将构建的慢病毒载体注射入小鼠体内,qRTPCR及Western blot检测小鼠肝脏OPN mRNA及蛋白的抑制效果。结果 成功构建针对OPN的shRNA慢病毒载体,经纯化、浓缩得到滴度为5×109TU/mL病毒原液。与正常对照组、阴性对照组相比,实验组OPN mRNA及蛋白表达水平明显下降;正常对照组、实验组OPN mRNA及蛋白表达水平无明显差别。结论 利用RNA干扰技术,借助慢病毒载体,成功构建小鼠肝脏OPN基因低表达模型。为进一步研究OPN在胆石症等疾病中的作用提供了有力工具。
  • 薛颖;陆烨;梁建英△
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    目的 建立测定兰索拉唑肠溶胶囊释放度的HPLC方法。方法 采用Xtimate C18柱(4.6mm×150 mm, 5 μm)色谱柱,流动相为水∶乙腈∶三乙胺(60∶40∶1),用磷酸调节pH至7.0,流速1.0 mL/min,检测波长为285 nm,柱温30℃。结果 兰索拉唑线性范围为1~25 μg/mL(r=0.999 99),平均回收率为101.5%、100.8%、101.3%(RSD为0.39%~1.54%),日内精密度(RSD)为0.68%~1.78%,日间精密度(RSD)为0.55%~1.87%,测得释放度均>75%。结论 本方法作为兰索拉唑肠溶胶囊的体外溶出度测定简便、灵敏、准确、重现性好,可作为兰索拉唑肠溶胶囊的质量控制方法。
  • 临床经验交流
  • 丁景新;陈建亮▲;张宏伟;冯炜炜;易晓芳;张旭垠;朱芝玲;张绍芬;华克勤△
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    目的 探讨剖宫产术后子宫切口憩室的可能发生原因及宫腹腔镜联合手术治疗的效果。方法 对2009年10月至2011年7月在复旦大学附属妇产科医院住院行宫腹腔镜联合手术修补剖宫产术后子宫切口憩室的14例患者进行回顾性分析和术后随访。结果 14例子宫切口憩室均表现为月经淋漓不净,经期平均为(14.0±4.4)天(8~25天),4例表现为不孕,4例有经期下腹坠痛。术前子宫输卵管造影(hysterosalpinography,HSG)检查憩室宽度平均为(19.3±5.0) mm (13~30 mm),深度平均为(11.6±3.2) mm (5~19 mm),显著高于阴道超声测量到的宽度和深度(P=0.005, P=0.002)。患者剖宫产手术指征为疤痕子宫(6例)、胎膜早破(3例)、难产(3例)、社会因素(2例)和胎儿窘迫(3例)。术中切口7例缝合1层,4例缝合2层,3例不详。14例患者行宫腹腔镜联合手术修补剖宫产憩室,无中转开腹手术,无术中并发症,无输血病例。平均手术时间为(130±47) min (75~225 min),平均出血量为(102±79) mL (30~300 mL),术后随访平均4.1月(2~12月)。月经复潮的12例患者除1例外,其余症状均得到改善,经期缩短为(8.6±3.2)天(6~10天),有效率91.7%(11/12)。9例术后2~3个月复查阴道超声,有2例仍有小子宫憩室(分别为6 mm×2 mm和7 mm×5 mm)。结论 HSG术前可以更好地评估子宫憩室的大小。再次剖宫产、胎膜早破可能是剖宫产术后子宫切口憩室发生的高危因素。宫腹腔镜联合手术修补子宫切口憩室的有效率高,可以显著改善患者的症状。
  • 张毅;范虹△;张新△;袁云峰;郭卫刚;钱成;王群
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    目的 探讨硬质支气管镜联合纤维支气管镜在成人气管支气管病变诊治中的作用和安全性。方法 回顾分析2010年9月至2011年6月期间20例大气道疾病患者(8例良性病变,12例恶性病变)进行26次硬质支气管镜联合纤维支气管镜手术的临床资料。全部患者全身麻醉后置入成人通用硬镜,经硬镜腔内置入纤支镜进行全面的检查和评估,酌情选用消融、冷冻、切除、取出及支架放置等操作。结果 全部患者均一次成功置入硬镜,无死亡病例和严重并发症发生,1例术中气道创面大量出血,在硬镜下控制出血后,为完整切除肿块而转开胸手术。术中主要并发症为低氧血症(3例,11.5%),均为一过性症状;术后主要并发症为咽喉疼痛(7例,26.9%),经对症治疗后均恢复。结论 硬质气管镜联合纤维支气管镜诊治成人大气道疾病安全、有效。
  • 汪鼎鼎;陈佳瑶;李文献△
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    目的 比较复合使用丙泊酚和瑞芬太尼,丙泊酚和利多卡因,或丙泊酚和瑞芬太尼及利多卡因对老年患者置入喉罩的条件及血流动力学的影响。方法 选取90名年龄65~75岁拟行择期手术的老年患者,随机分为3组。麻醉诱导使用2.0 mg/kg丙泊酚分别复合1.5 μg/kg瑞芬太尼(R组)、1.5 mg/kg利多卡因(L组)或1.0 μg/kg瑞芬太尼和1.0 mg/kg利多卡因(RL组)。诱导后3 min,由一名单盲于诱导药物的麻醉医师进行喉罩置入,且对喉罩置入难度进行评估和分级,并记录不良反应(张口度不佳、作呕、呛咳、四肢或头部活动、呃逆和喉痉挛)。喉罩置入条件分级分别为1级:良好,对喉罩置入无反应;2级:可接受,喉罩置入过程有作呕或吞咽;3级:差,无法张口或喉罩置入过程患者咬管。记录喉罩置入前后的血流动力学参数。结果 喉罩置入条件评估为良好的人数在RL组中为26(86.7%),在R组中为27(90%),在L组中为18(60%)(P<0.05);作呕、体动、喉痉挛的发生率在L组中明显增加;低血压的发生率在R组中明显增加(R组60% vs. RL组10% vs. L组0%,P<0.05)。结论 老年患者中,使用丙泊酚复合小剂量瑞芬太尼和利多卡因进行麻醉诱导能够为喉罩置入提供良好条件,并能够维持血流动力学相对平稳。
  • 方法技术
  • 储德节△;郭水根;潘春峰;王静;都勇;余竹元
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    目的 初步探索肺炎衣原体(Chlamydia pneumoniae,Cpn)诱发大鼠肺癌模型的建立。方法 应用多次气管内注入Cpn菌液(TW183)的方法试制肺癌大鼠模型,微量免疫荧光(microimmunofluorescence,MIF)法检测大鼠血清中Cpn特异性抗体,PCR检测肺癌组织中CpnDNA,酶联免疫法检测肺癌组织中Cpn特异性抗原。结果 单独Cpn感染组Wistar鼠的Cpn感染率为72.9%(35/48),Cpn感染联合苯并芘(benzopyrene,Bp)组的Cpn感染率为76.7%(33/43),两组的肺癌发生率分别为25.0%(12/48)和44.2%(19/43),与正常对照组相比,P值分别为0.001和0.000。结论 Cpn感染诱发大鼠肺癌模型的建立是成功的,有助于肺癌的防治及其发病机制研究。
  • 综述
  • 李敏(综述);宋陆军;秦新裕△(审校)
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    近年来,1型糖尿病(type 1 diabetes,T1D)的发病率不断上升,其发病是遗传、环境、免疫等因素共同作用引发了胰岛β细胞为主体的自身免疫损害反应。T1D的发病机制涉及免疫应答及调节等免疫过程,其中细胞免疫在T1D的发病过程中起着重要作用,CD4+及CD8+ T淋巴细胞的浸润,B淋巴细胞、自然杀伤细胞(natural killer cells,NK)、树突状细胞(dendritic cells,DC)等免疫细胞共同参与了β细胞的损伤,最终引起T1D的发病。
  • 韦君(综述)樊晓明△(审校)
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    小RNA(microRNA,miRNA)是一类长约18~25个核苷酸序列的内源性非编码单链小RNA,通过与靶基因序列特异性相互作用,在转录后水平调节基因表达,从而调控细胞增殖、分化与凋亡等过程。结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是最常见的恶性肿瘤之一,我国CRC发病率呈逐年上升趋势,且发病年龄亦有年轻化趋势。越来越多的研究表明,特异性miRNA表达异常与CRC的发生、发展密切相关。近几年来,miRNA在CRC的诊断、靶向治疗及预后评估等方面的研究已成为热点。
  • 周儒△;周易明(综述);陈宗祐(审校)
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    近年来,大量研究发现骨桥蛋白(osteopontin,OPN)在结肠肿瘤的发展及转移过程中起到重要作用,因此OPN有望为结肠肿瘤早期诊断、复发和预后判断提供新的指标,亦有望成为防治肿瘤及肿瘤转移的潜在靶点。本文结合近几年文献,对OPN在结肠肿瘤发生发展中所起的作用及其在结肠癌诊断治疗方面潜在的临床价值作一综述。
  • 孙颖(综述)姜林娣△(审校)
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    基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)是一种锌依赖性的肽链内切酶,近来因其特有的理化作用而受到越来越多的关注。新近研究发现MMPs可以参与炎症反应、血管重构等生理病理过程,提示它可能与某些炎症相关的血管疾病如大动脉炎、动脉粥样硬化、腹主动脉瘤,甚至高血压,急性冠脉综合征等有着不容忽视的相关性。本文重点阐述MMPs的基本生化特性,其在炎症反应与血管重构中的作用以及MMPs在大动脉炎病情评估方面的的价值,希望能为临床及基础研究提供新的参考。
  • 个案报告
  • 周夏俊;陈升东;管阳太△
    . 2012, 39(05): 545-547.
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  • 林杰△;何清;肖立;陈力平;孔维菊
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